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硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)代测检测服务
硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)代测检测服务
品牌:原鑫生物
类别:代测服务 - LC-MS检测|液相串联质谱
规格:暂无
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    硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)代测检测测定服务

    硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)代测检测测定服务

    测定意义:

    TrxR是-种NADPH依赖的包含FAD构造域的二聚体硒酶,属于b门啶核苷酸-二硫化物氧化复原酶家族成员,与硫氧还蛋白以及NADPH共同构成了硫氧还蛋白系统。TxR与GR活性相似。催化GSSG复原生成GSH,是谷胱甘肽氧化复原循环关键酶之一。GR具有多种生物学功用,调理机体氧化复原反响和细胞生长与增殖,与人类某些疾病发病机制有关,可能是干预治疗的靶点。

    测定原理:

    TrxR催化NADPH将DTNB复原为TNB,经过测定412nm波优点TNB的增加量,即可计算TrxR活性。

    测定办法:可见分光光度法

    TrxR活性计算:

    (1)按蛋白浓度计算

    活性单位(U)定义:在25C或者37C中,每毫克蛋白每分钟催化1μmo1DTNB复原。

    TrxR(U/mgprot)=(OA测定管-△A空白管)/ε/dXV反总/(CprXV样)一T

    =0.147X(△A测定管-△A空白管)/Cpr.

    (2)按样实质量计算

    活性单位(U)定义:在25C或者37C中,每克样本每分钟催化1μm1DTNB复原。

    TrxR(U/g)=(OA测定管-△A空白管)+ε-dXV反总+(wXV样+V样总)+T

    =0.147X(OA测定管-△A空白管)/W

    (3)按细胞数量计算

    活性单位(U)定义:在25C或者37C中,每10*个细胞每分钟催化1μmo1DTNB复原。

    TrxR(U/10*ce11)

    =(OA测定管-△A空白管)一ε+dXV反总+(细胞数量XV样一V样总)/T

    =0.147X(OA测定管-OA空白管)十细胞数量

    ε:TNB在412nm处的微摩尔消光系数,0.0136L/μmo1/cm;d:比色皿管光径,1cm;V反总:反响体系总体积(L),1000μL=0.001L;Cpr:.上清液蛋白质浓度(mg/mL),需求另外测定;V样:参加反响体系中上清液体积(mL),100μL=0.1ml;v样总:参加提取液体积,1mL;W,样实质量,g;T:反响时间(min),5min.

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