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柠檬酸检测在高效液相色谱中的应用
柠檬酸检测在高效液相色谱中的应用
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柠檬酸检测在高效液相色谱中的应用

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柠檬酸的物理性质:

在室温下,柠檬酸为无色半透明晶体或白色颗粒或白色结晶性粉末,无臭、味极酸,有涩味,有微弱腐蚀性,潮解性强,并伴有结晶水化合物生成,在潮湿的空气中微有潮解性。它可以以无水合物或者一水合物的形式存在:柠檬酸从热水中结晶时,生成无水合物;在冷水中结晶则生成一水合物。加热到78 ℃时一水合物会分解得到无水合物。在15摄氏度时,柠檬酸也可在无水乙醇中溶解。柠檬酸结晶形态因结晶条件不同而不同,有无水柠檬酸C6H8O7也有含结晶水的柠檬酸2C6H8O7.H2O、C6H8O7.H2O或C6H8O7.2H₂O。


柠檬酸检测的化学性质:从结构上讲柠檬酸是一种三羧酸类化合物,并因此而与其他羧酸有相似的物理和化学性质。加热至175 ℃时它会分解产生二氧化碳和水,剩余一些白色晶体。柠檬酸是一种较强的有机酸,有3个H+可以电离; 加热可以分解成多种产物,与酸、碱、甘油等发生反应。

柠檬酸的检测原理:柠檬酸在酸性缓冲液中,利用反相键合色谱法将其从样品基质中分离出来,根据该类物质在紫外波长下的吸收进行定性和定量分析。


柠檬酸检测在高效液相色谱中的应用图2

实验的试剂:

1)溶剂:水,过滤后的二次蒸馏水

2)流动相:0.5%的H3PO4/KH2PO4缓冲液,PH=2.81, 含2.5%乙腈

3)柠檬酸标准品;纯度99.2%和99.5% 

4)柠檬酸标准溶液分别准确称取苹果酸、柠檬酸标准品0.2g 和0.02g ,精确至0.0001g,用过滤后的二次蒸馏水将标准品溶解,转移、定容于50ml容量瓶中,混匀后贴标签备用。

5)柠檬酸标准工作溶液分别将上述标准品贮备液以5倍和10倍比例稀释,得到三个不同浓度的系列,在给定的色谱条件下,每一浓度样品进样三次,然后绘制出标准工作曲线。标准溶液应避光,在0~4℃下贮存,标准液贮存期不超过二个月。

仪器所使用的玻璃仪器必须是洁净的。实验过程中需要使用的仪器:液相色谱,单元泵,可变波长检测器,化学工作站 ,色谱柱,进样器,需要的色谱条件:流动相:0缓冲液(PH=2.81);含乙腈。流量: 柱温:40℃检测进样量:


柠檬酸检测在高效液相色谱中的应用图3

关于柠檬酸的实验测定步骤:

1。样品溶液的制备称取浓缩果汁4.0~5.0g 或清汁10ml,精确至0.01g,用二次蒸馏水将其溶于50ML 容量瓶中,定容至刻度,混匀后,用0.45um滤膜的过滤器将其过滤至样品瓶中,贴上标签备用。

2。测定:在以上色谱条件下,运行仪器和测试方法,待基线稳定后,按照标准溶液、样品的顺序进样。

3。计算根据标准液绘制的标准曲线进行外标法定量,保留时间和响应因子均由标准液确定。

关于柠檬酸保存方法和储存条件:

柠檬酸产品用内衬食品用聚乙烯袋及双层牛皮纸

应注意防雨、防潮、防晒、不得与有毒、异味、有色粉未或腐蚀性物质混装、混运。

本品应贮存于阴凉、干燥库房中不宜露天堆放。




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