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植物类黄酮含量检测试剂盒代测服务说明

植物类黄酮含量检测试剂盒

Plant Flavonoids Content Assay Kit


产品描述

植物类黄酮是广泛存在于蔬菜、水果、牧草和药用植物中的次生代谢物,主要以游离态或与糖结 合为苷的形式存在,属于生物活性强、毒副作用小、药用价值高的天然植物成分,在医药领域具有广 阔的应用前景和潜在的开发利用价值。 类黄酮与铝离子能够在碱性亚硝酸盐溶液中形成红色络合物,产物在 510 nm 处具有特征吸收峰, 通过吸光值的变化即可定量检测植物类黄酮的含量。

 

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产品使用说明

测定过程中所需要的仪器和试剂:可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、可调式移 液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。

1.植物类黄酮的提取(可根据预实验结果适当调整样本量及比例) 取适量植物样本烘干至恒重,粉碎后过 30-50 目筛;称取 0.1 g 粉碎样本,加入 1 mL 提取液,超 声提取(60℃,功率 300 W,超声 5 s,间歇 8 s,总时间 30 min);12000 rpm 常温离心 10 min,取全 部上清即为待测样本。

2.测定步骤 

①分光光度计预热 30 min 以上,调节波长至 510 nm,蒸馏水调零。

②在离心管中依次加入下列试剂:

图片1.png


吸光值测定(显色后 1 h 内完成测定):将反应液置于 1 mL 玻璃比色皿中,测定 510 nm 处吸光 值,记为 A 测定、A 对照、A 标准和 A 空白;计算∆A 测定=A 测定-A 对照,∆A 标准=A 标准-A 空 白。注:每个测定管均需设一个对照管,空白管只需测定 1-2 次。

标准曲线的建立:以 0.4、0.2、0.1、0.05、0.025 mg/mL 为横坐标(x),以其对应的∆A 标准为纵 坐标(y),绘制标准曲线,得到标准方程 y=kx+b,将∆A 测定带入公式中得到 x(mg/mL)。

1. 植物类黄酮含量的计算

图片2.png

注意事项 

①若∆A 测定超出标准线性吸光值范围:建议适当增加样本量或将待测样本适当稀释后再进行测 定,计算时相应修改;

②为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准), 确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定, 过程中问题请您及时与工作人员联系。


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