脲酶（UE）活性检测试剂盒 Urease (UE) Activity Assay Kit 
一、脲酶（UE）活性检测试剂盒产品描述 脲酶是能够专一性催化尿素分解为铵和碳酸的含镍寡聚酶，广泛分布于植物种子中，也存在于动
物血液、尿液和部分微生物中，脲酶作为一种重要的生物制剂，在农业、畜牧业、医疗、环境保护、
食品安全监测和建材等领域具有广泛应用。
脲酶水解尿素产生的 NH3-N，在强碱性介质中能够与次氯酸盐和苯酚反应，生成水溶性蓝色染料
靛酚蓝，产物在 630 nm 处具有特征吸收峰，通过吸光值的变化即可表征脲酶的活性。
二、脲酶活性检测试剂盒产品内容图示 
三、脲酶（UE）活性检测试剂盒产品使用说明 测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/匀浆
器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。 1.粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量及比例）
①细菌或细胞：离心收集细菌或细胞至离心管内，按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）
为（500-1000）：1 的比例（建议 500 万个细菌或细胞加入 1 mL 提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功
率 300 W，超声 3 s，间隔 7 s，总时间 3 min），4℃ 12000 g 离心 15 min，取上清置于冰上待测。
②组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1：（5-10）的比例（建议称取 0.1 g 组织，加
入 1 mL 提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃ 12000 g 离心 15 min，取上清置于冰上待测。
③血液（浆）、培养液等液体样本：直接检测或适当稀释后再进行检测。 2.测定步骤
①分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长至 630 nm，蒸馏水调零。
②灭活酶液的制备：取适量粗酶液/液体样本沸水浴处理 5-10 min（密封以防止水分散失），冷却
至室温后即为灭活酶液。 
吸光值测定：测定 630 nm 处吸光值，记为 A 测定、A 对照、A 标准和 A 空白；计算∆A 测定=A
测定-A 对照，∆A 标准=A 标准-A 空白。注：每个测定组均需设一个对照组，空白组只需测定 1-2 次。
标准曲线的建立：以 6.0、5.0、4.0、2.0、1.0、0.5 µg/mL 为横坐标（x），以其对应的∆A 标准为
纵坐标（y），绘制标准曲线，得到标准方程 y=kx+b，将∆A 测定带入公式中得到 x（µg/mL）。
脲酶（UE）活性检测试剂盒活性计算图示
注释：V 样：反应体系中加入粗酶液的体积，0.02 mL；V 提：粗酶液总体积，1 mL；V 酶促：
酶促反应体系总体积，0.14 mL；T：反应时间，60 min；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，
g；细菌或细胞数量：以百万计。
四、脲酶（UE）活性检测试剂盒注意事项 ①若A测定超出标准吸光值线性范围：超出最高值建议将粗酶液或反应混合液适当稀释后再进行
测定；低于最低值可适当增加样本量后再进行测定，计算时相应修改； ②显色完成后应在1 h内完成测定，测定管颜色应与标准管颜色一致（蓝色），若显色为黄色或绿
色，则表明NH3-N浓度过高，应将粗酶液或反应混合液适当稀释后再进行测定，计算时相应修改； ③为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），
确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，
过程中问题请您及时与工作人员联系。
产品链接：http://www.shyx-bio.com/products-189.html 来源出处：http://www.shyx-bio.com/newss-135.html |
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