生化试剂盒 - 酸性蛋白酶（ACP）活性检测试剂盒说明书 Acidic Protease (ACP) Activity Assay Kit 一、酸性蛋白酶（ACP）活性检测试剂盒产品描述 酸性蛋白酶（ACP）是在酸性环境下作用于蛋白质肽键的一类蛋白酶，可将蛋白质水解为氨基酸、
多肽以及游离氨基酸。酸性蛋白酶能在低 pH 条件下能够有效水解蛋白质，在酒精发酵、食品加工、
酿造、饲料添加、皮革加工等领域具有广泛应用。
酸性蛋白酶能够在酸性条件下，催化酪蛋白水解产生酪氨酸，酪氨酸在碱性条件下能够还原磷钼
酸化合物生成钨蓝，产物在 680 nm 处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可表征酸性蛋白酶的活性。
二、酸性蛋白酶（ACP）活性检测试剂盒产品内容图示 
三、酸性蛋白酶（ACP）活性检测试剂盒产品使用说明 测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/匀浆
器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。 粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量及比例） ①细菌或细胞：离心收集细菌或细胞至离心管内，按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）
为（500-1000）：1 的比例（建议 500 万个细菌或细胞加入 1 mL 提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功
率 300 W，超声 3 s，间隔 7 s，总时间 3 min），4℃ 8000 g 离心 10 min，取上清置于冰上待测。 ②组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1：（5-10）的比例（建议称取 0.1 g 组织，加
入 1 mL 提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃ 8000 g 离心 10 min，取上清置于冰上待测。
③血清、培养液等液体样本：直接测定或使用提取液适当稀释后再进行测定。 测定步骤 ①分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长至 680 nm，蒸馏水调零。 ②使用前将试剂一、试剂二和试剂三 30℃预热 30 min。 ③在离心管中依次加入下列试剂： 
吸光值测定：取 200 μL 反应液于微量玻璃比色皿/96 孔板中，测定 680 nm 处吸光值，记为 A 测
定、A 对照、A 标准和 A 空白；计算∆A 测定=A 测定-A 对照，∆A 标准=A 标准-A 空白。注：标准管
和空白管只需测定 1-2 次，每个测定管均需设立一个对照管。 .酸性蛋白酶（ACP）活性计算
注释：C 标准：酪氨酸标准应用液浓度，0.25 μmol/mL；V 样：反应体系中加入粗酶液的体积，
0.02 mL；V 提：粗酶液总体积，1 mL；V 酶促：酶促反应总体积，0.1 mL；Cpr：粗酶液蛋白浓度，
mg/mL；W：样品质量，g；T：催化反应时间，10 min。
四、酸性蛋白酶（ACP）活性检测试剂盒注意事项 ①若∆A 测定差值较小，可适当延长第一步反应时间（15-25 min），计算时相应修改； ②为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），
确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，
过程中问题请您及时与工作人员联系。
文章来源：http://www.shyx-bio.com/newss-137.html 产品链接：http://www.shyx-bio.com/products-194.html |
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