总胆固醇（TC）含量检测试剂盒 Total Cholesterol (TC) Content Assay Kit 
一、总胆固醇（TC）含量检测试剂盒产品描述 胆固醇（Cholesterol）又称胆甾醇，是广泛存在于动物体内的一种环戊烷多氢菲衍生物，可作为
合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素 D 等生理活性物质的重要原料，也是构成细胞膜的
主要成分，总胆固醇（TC）是指所有脂蛋白所含胆固醇的总和，包括游离胆固醇和胆固醇酯。
胆固醇酯酶可催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇（FC）和游离脂肪酸（FFA），胆固醇氧化酶可
催化游离胆固醇氧化生成∆4-胆甾烯酮和 H2O2，过氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚生成
红色醌类化合物，产物在 500 nm 处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可定量检测总胆固醇的含量。
二、总胆固醇（TC）含量检测试剂盒产品内容
三、总胆固醇（TC）含量检测试剂盒产品使用说明 测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/匀浆
器、可调式移液器/多道移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱、异丙醇和蒸馏水。 总胆固醇的提取（可根据预实验结果适当调整样本量及比例） ①细菌或细胞：离心收集细菌或细胞至离心管内，按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）
为（500-1000）：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1 mL 提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功
率 300 W，超声 2 s，间隔 3 s，总时间 3 min），4℃ 10000 g 离心 10 min，取上清置于冰上待测。 ②组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1：（5-10）的比例（建议称取 0.1 g，加入 1
mL 提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃ 10000 g 离心 10 min，取上清置于冰上待测。 ③血清（浆）、培养液等液体样本：直接测定或适当稀释后再进行检测。 测定步骤 ①可见分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长至 500 nm，蒸馏水调零。 ②TC 工作液的制备（现用现配）：按试剂一：试剂二：试剂三= 1 mL：10 μL：10 μL 的比例配置。 ③在 96 孔板或离心管中依次加入下列试剂：
吸光值测定：测定 500 nm 处吸光值，记为 A 测定、A 标准和 A 空白；计算∆A 测定=A 测定-A
空白，∆A 标准=A 标准-A 空白。注：空白管只需测定 1-2 次。
标准曲线的建立：以 3.0、2.0、1.0、0.5、0.25、0.125 μmol/mL 标准稀释液浓度为横坐标（x），
其对应的∆A 标准为纵坐标（y），绘制标准曲线，得到标准方程 y=kx+b，将∆A 测定带入公式中得到
x（μmol/mL）。
3.总胆固醇（TC）含量计算
四、总胆固醇（TC）含量检测试剂盒注意事项 ①若∆A测定超出标准线性吸光值范围：高于最高值将待测样本使用提取液适当稀释后再进行测
定，低于最低值建议适当增加样本量后再进行测定，计算时相应修改；
②为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），
确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，
过程中问题请您及时与工作人员联系。
产品链接：http://www.shyx-bio.com/products-198.html 文章来源：http://www.shyx-bio.com/newss-138.html |
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