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脂肪酸类 - 甘油三酯(TG)含量检测试剂盒说明书

脂肪酸类 - 甘油三酯(TG)含量检测试剂盒说明书

Triglyceride (TG) Content Assay kit

一、甘油三酯(TG)含量检测试剂盒产品描述 

甘油三酯(TG)是由长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要的 呼吸底物和供能物质,在脂肪酸运输过程中具有重要作用。血清中内源性三酰甘油主要以 VLDL 的 形式运输,外源性三酰甘油主要以 CM 的形式运输,甘油三酯含量的增高与动脉粥样硬化性心血管疾 病密切相关。 甘油三酯经 KOH 皂化水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在铵离子存在下甲醛 能够与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,产物在 420 nm 处具有特征吸收峰,通过吸光值的变化即可定量 检测甘油三酯的含量。


二、甘油三酯(TG)含量检测试剂盒产品内容

甘油三酯含量检测试剂盒说明图1


三、甘油三酯(TG)含量检测试剂盒产品使用说明 

        测定过程中所需要的仪器和试剂:可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/匀浆 器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴、正庚烷、异丙醇和蒸馏水。

  1. 甘油三酯(TG)的提取(可根据预实验结果适当调整样本量及比例)

    ①细菌或细胞:离心收集细菌或细胞至离心管内,按照细菌或细胞数量(104 个):试剂一体积(mL) 为(500-1000):1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1 mL 试剂一)处理样品,冰浴超声破碎(功 率 20%或 200 W,超声 2 s,间隔 1 s,总时间 1 min),4℃ 8000 g 离心 10 min,取上清待测。

    ②组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:(5-10)的比例(建议称取 0.1 g 组织,加 入 1 mL 试剂一)处理样品,冰浴匀浆,4℃ 8000 g 离心 10 min,取上清待测。

    ③血清(浆)、培养液等液体样本:直接测定或适当稀释后再进行测定。

  2. 测定步骤

    ①分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长至 420 nm,蒸馏水调零。

    ②在离心管中依次加入下列试剂:

  甘油三酯含量检测试剂盒说明图2

注:加入试剂二后需剧烈震荡,振荡幅度、时间、反复次数以及等待分层时间均应保持一致;

吸光值测定:取 200 μL 反应液至微量玻璃比色皿或 96 孔板中,测定 420 nm 处吸光值,记为 A 测定,A 标准和 A 空白;计算∆A 测定=A 测定-A 空白,∆A 标准=A 标准-A 空白。注:空白管只需测 定 1-2 次。

3.甘油三酯(TG)含量计算

甘油三酯含量检测试剂盒说明图3


四、甘油三酯(TG)含量检测试剂盒注意事项 

①为确保试验重复性,加入试剂二后需剧烈震荡,振荡幅度、时间、反复次数以及等待分层时间 均应保持一致,检测体系中 65℃水浴后冷却时间应保持一致; 

②若测定吸光值超出标准吸光值线性范围:高于最高值将样品使用试剂一适当稀释后再进行测定, 低于最低值建议适当增加样本量后再进行测定,计算时相应修改;

③检测过程中使用具有易挥发性物质,建议在通风橱中进行测定,并做好防护措施; 

④为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准), 确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定, 过程中问题请您及时与工作人员联系。


产品链接:http://www.shyx-bio.com/products-199.html

文章来源:http://www.shyx-bio.com/newss-139.html

 


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