elisa检测试剂盒的三个基本原理 原鑫生物elisa综合全类型试剂盒均价活动：￥699 
ELISA检测试剂盒又称为酶联免疫分析试剂盒，该试剂盒具有特异性高、灵敏度好、稳定性高及操作简便等特点，现已被广泛应用于基础研究、食品药品检测、农产品测定等检测领域，了解elisa检测试剂盒的基本原理在其日常的使用过程中是十分必要的，这让实验操作者在使用ELISA试剂盒进行检测时的操作流程更加规范并减少错误发生，进而在提高实验结果准确度的同时提高了操作者对实验的了解程度。接下来就介绍一下ELISA检测试剂盒的原理及相关注意事项：
一、elisa检测试剂盒的基本原理
1.抗原或抗体的固相化：将抗原（抗体）与固体表面通过蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分产生的吸附力而进行相互吸附，抗原（抗体）作为固相抗原（抗体），结合在固相载体表面的抗原（抗体）仍保持其免疫学活性，是ELISA检测试剂盒中最为重要的基础原理之一。 2.抗原或抗体的酶标记：酶标记抗原（或抗体）也是ELISA检测试剂盒中的重要组成部分之一，抗原（或抗体）可通过共价键与酶结合形成酶标记抗原（或抗体），酶标记抗原或抗体同时保留了抗原（或抗体）的免疫学活性和酶的活性。酶标记抗原（或抗体）在显色反应中起着重要的作用。 3.待测物结合反应过程：在测定过程中，受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原（或抗体）进行结合反应，使代测物质也间接的固定在固相载体上。可以使用洗涤法将固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中游离的其他物质进行分离，然后将酶标记的抗原（或抗体）加入到体系中，通过相关反应间接地结合在固相载体上。此时固相上的酶量与代测标本中受检物质的量具有一定的比例关系，也就是说酶量越多代表着代测物质的数量越多。 4.显色反应的发生：酶结合物与相应抗原或抗体结合后，加入酶反应的底物，根据加入酶反应底物后发生的颜色反应来判定免疫反应是否发生和代测物是否存在，并且反应中颜色的深浅是与代测标本中相应抗原或抗体的量成正比例关系的，所以底物显色的程度能够表示代测物质的定性和定量检测结果，代测物质含量可以用紫外分光光度计或酶标仪进行测定分析。 5.ELISA试剂盒主要特征：ELISA检测试剂盒法在原理上主要可以分为两个方面，一是抗原与抗体特异性结合的免疫学原理基础，二是酶标抗原（或抗体）与底物产生显色反应的信号放大原理，这两个方面使ELISA检测试剂盒法同时具有较高的特异性和敏感性。
二、elisa检测试剂盒主要类型分类
1.双抗体夹心法：ELISA试剂盒的双抗体夹心法中最重要的就是固相抗体和酶标抗体，首先将抗体固定在聚苯乙烯板上形成固相抗体，然后加入稀释后的代测样品，并进行洗涤，洗去游离的其他物质，洗涤好之后加入酶标抗体，再次进行洗涤，加入相关底物形成显色反应，进而测出代测物质（抗原）的含量。 2.竞争法测抗原：在使用ELISA试剂盒法测定小分子抗原或半抗原时，因小分子抗原或半抗原因位点的原因不能用双抗体夹心法进行测定，所以采取竞争法进行检测，其基本原理是标本中的待测抗原和酶标抗原共同与固相抗体进行竞争性结合，待测标本中目标抗原的含量越多，结合在固相上的酶标抗原就越少，显色就会越浅，以此来对小分子抗原或半抗原的含量进行测定。 3.间接法测抗体：ELISA试剂盒检测抗体一般选择使用间接法，其基本原理为将已知抗原包被在聚苯乙烯板上，进行固定处理，将一定量的代测样本稀释液加入到已经包被抗原的反应板之中，代测抗体与固相抗原进行特异性结合，然后加入酶标记的抗抗体（二抗），二抗与代测抗体可以结合起来，这样酶与底物产生的显色反应就可以反映出待测抗体的含量。
三、elisa检测试剂盒的操作注意事项
1.试剂盒储存：对ELISA检测试剂盒进行储存时应将其放入4℃-8℃冷藏室内进行保存，试剂盒从冷藏室中取出后应在室温平衡15-30分钟后再进行使用。 2.加样：加样时尽可能缩短加样之间的时间间隔，并且进行一次加样的时间最好控制在5分钟之内，如果标本数量过多，尽量使用排枪进行加样，可以缩短加样操作时间，减少实验误差。 3.实验操作：严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准，并且保证操作台及实验环境的整洁与无菌，实验后的所有样品，洗涤液及废弃物均按照传染物进行处理。
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