ELISA试剂盒在实际的操作过程中需要注意哪些?今天上海原鑫生物科技公司小编就与大家一同分享一下,总体来说ELISA试剂盒的操作过程中有以下多点需要注意。
1. ELISA试剂盒为体外检测试剂,效期内运用,试剂应视为感染物,不同总批号的试剂是不可以一起混用的,这点值得注意。 2. ELISA试剂盒在操作运用之前应当将盒内的各种小瓶试剂都去除,正常室温情况下需要放置至少30分钟。 3. 浓缩洗刷液变成结晶后,于37°C孵育15分钟。 4. 如果24小时内进行试验.标本可存放于2〜8℃。不需及时试验.标本-20℃保存,防止反复冻融。 5. 试剂盒保存于2〜8°C. 不可以冷冻,有效期在试剂盒内都会标明,请认真阅读。 6. 加样结束后.应注意细微摇摆微孔反响条.以便使孔中的液体充沛混匀。 那么ELISA试剂盒操作过程又是如何的呢: 1.取出酶标板,设空白孔,按照次第对应别离参加100μl的规范品于空白微孔中(空白孔视为0号规范品,用医用蒸馏水代替) 2.别离标记样品编号,参加100μl的稀释样品于空气微孔中(不同的样本选用不同的吸头)。 3.将酶标板置于37℃温育30分钟 4.将酶标板板取出,将其间的液体甩去,每个孔中悉数加满使用洗刷液后,当即甩去液体。 5.每个孔中加满使用洗刷液后,细微振摇酶标板30秒后将孔中的使用洗刷液甩去,在吸水纸大将酶标板拍干。 6.重复第5个过程5次,在吸水纸大将酶标板拍干。 7.在规范品孔和样品孔中参加的100μl的酶标巧合溶液。 8.将96孔板置于37℃温育30分钟。 9.将酶标板取出,将其间的液体甩去,每个孔中悉数加满使用洗刷液后,当即甩去液体。 10.每个孔中再次加满洗刷使用液后,室温细微振摇酶标板30秒后将孔中的使用洗刷液甩去,在吸水纸大将酶标板拍干。 11.重复第5个过程5次,在吸水纸大将酶标板拍干。 12.在每个孔中参加底物A 50μl后当即参加底物B 50μl。悄悄振动混匀。(A液.B液使用不同的吸头加样) 13.将酶标板置于37℃避光温育反响15分钟。 14.每个微孔中参加50μl的停止液,悄悄振动混匀。 15.在酶标仪上,450nm处测定OD;显色后,15分钟内进行测定。 16.依据制备的规范曲线,核算样本含量。 以上小编不仅说明了对于ELISA试剂盒在实际操作过程中需要注意的多项事项,同时也对ELISA试剂盒的样本进行了说明,而在日常实际过程中大家需要使用的时候尽量以ELISA试剂盒内部的说明书进行阅读分析后进行操作,如有更多疑问可登录原鑫生物科技有限公司(上海)www.bio-shyx.com寻求专业ELISA试剂盒操作的研究人员咨询。 |