人肿瘤坏死因子α ELISA试剂盒说明书（一） 
上海原鑫生物科技从事科研试剂的优质企业。该文章详细的介绍了人肿瘤坏死因子α ELISA试剂盒的背景、检测原理、注意事项、安全提示、试剂盒组成及储蓄和实验器材这六个方面。本文仅供于科研研究，不得用于临床试验！ 一、背景简介 肿瘤坏死因子α（Yumor necrosis factor-aipha）又称TNF、TNFA或TNFSF2,是TNF超级家族的原型细胞因子，参与调节细胞增殖、分化、调亡、脂质代谢和凝血等多种生物学过程。两种受体，TNF-R1（TNF受体1型；CD12a；p55/6）和TNF-R2（TNF受体2型；CD12b；p75/8）与TNF-α结合。TNF-α蛋白主要由巨噬细胞产生，大量的这种细胞因子在脂多糖、其他细菌产物和白细胞介素-1（IL-1）的作用下释放。肿瘤坏死因子α（TNF-α）参与肿瘤的发生，因此被认为是肿瘤治疗中的一种分子机制。
二、检测原理
酶联免疫吸附实验（ELISA）是一种固相夹心ELISA（酶联免疫吸附实验）。它利用在96孔板上包被人肿瘤坏死因子α的单克隆抗体，将标准品和样本添加到孔中，使肿瘤坏死因子α与固定化抗体结合，然后加入辣根过氧化物酶结合的小鼠抗人肿瘤坏死因子α的单克隆抗体，产生抗原-抗体-抗原的“三明治”结构。再次清洗并加入TMB基质溶液，其产生的颜色深浅与样品中人肿瘤坏死因子α的含量成线性关系。结束酶反应，添加停止溶液，并在450nm处读取微孔吸光度。
三、注意事项
1. 试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。 2. 试剂盒未使用时应保存在 2-8℃冰箱，复溶标准品请当天使用。 3. 试剂盒使用前请在室温下复温 30 min，配置试剂请充分混匀。 4. 在试验中标准品和样本建议作复孔检测。 5. 为避免交叉污染，请在试验中使用 1 次性试管，枪头，封板膜，及洁净塑料容器。 6. 检测抗体HRP酶结合物溶液为即用型，请于2-8℃保存，禁止冷冻保存。 7. 除了试剂盒中的浓缩洗涤液，显色液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂盒内含的试剂代替本试剂盒中的某单个组分。 8. 为保证结果准确，每次检测均需做标准曲线。
四、安全提示
试剂盒中的终止液为酸性溶液，操作人员在使用时请带上手套并注意防护；在操作过程中也要避免试 剂接触皮肤和眼睛，如果不慎接触，请用大量清水清洗；检测血液样本及其它体液样本时，请按国家生物 实验室安全防护有关管理规定执行。
五、试剂盒组成及储存
试剂盒组成 
六、自备实验器材
1． 酶标仪 2． 高精度移液器及一次性吸头：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl 3． 洗板机 4． 37℃孵育箱 5． 超纯水，去离子水 6． 一次性稀释用聚丙烯试管
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