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人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA Kit试剂盒​
人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA Kit试剂盒​
品牌:原鑫生物
货号:YX-E100594
规格:48T/96T
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人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA Kit试剂盒

人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA Kit试剂盒以其具有高特异性、回收率、线性、变异系数、稳定性等特点深受国外市场认可;原鑫生物专注于免疫学、细胞生物学、肿瘤、神经生物学等领域。
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产品介绍

产品名称:人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA Kit

品牌:原鑫生物

货号YX-E100594

检测方法双抗夹心

规格48T/96T

种属Human

存储2-8℃6个月

精密度(%):批内差: CV<10%   批间差: CV<12%

注意事项人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA Kit仅供科研使用


实验原理

【操作步骤】
1、取出试剂盒,室温(20-25℃)放置30分钟。
2、分组:取出96孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。10个标准孔,1个空白对照
3、标准品的稀释:准备小试管6只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul 加入一只已编好号的试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第三只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第五只试管中,充分混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
4、加样:依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入50ul的蒸馏水;其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
5、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
6、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒弃去,如此重复5次,拍干。
7、加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液(空白对照孔除外)。
8、温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9、洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15-30s,充分清洗酶标板5次,用吸水纸彻底拍干。
10、显色:各孔加入显色剂A液50ul后,再加入显色剂B液50ul。
11、终止:25-37℃下避光反应10-15分钟,加入50ul终止液。
12、读板:在450nm波长读取各孔的OD值。
注:读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,读板时间控制在终止反应后的30分钟内,以免影响准确性。

试剂盒组成及试剂配制
1、酶联板:一块(96孔;48孔)
2、标准品:2瓶
3、样品稀释液:1×20ml/瓶
4、生物素标记抗体稀释液:1×10ml/瓶
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液:1×10ml/瓶
6、生物素标记抗体:1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素:1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液:1×10ml/瓶
9、浓洗涤液:1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液:1×10ml/瓶

【实验材料与试剂配制】
1、仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2、洗液的配制:按比例配制洗液备用。
【样品收集、处理及保存】
1、细胞培养上清:
适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2、细胞:
PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3、血清:
在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4、血浆:
应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5、体液:
包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6、组织标本:
切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000rmp离心20分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7、保存:
如果样品不能立即检测,应将其分装,-70℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


研发、生产科研产品:

ELISA试剂盒:多种属、1000多种指标:人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、仓鼠、猪、马、鸡、犬、豚鼠、猴、绵羊
抗体:兔多抗、鼠单抗种类丰富,一抗1万余种,二抗100多种;
重组蛋白:多项发明专利,原核表达系统稳定表达蛋白1000余种。


在线联系:(周经理) 17621047120 QQ:2441609688(任经理)
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