人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISAKit试剂盒/测试盒
数量:大量 供应商:上海原鑫生物科技有限公司 检测限:参考说明书 检测方法:ELISA 应用:定性/定量 适应物种:人 样本:血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆 规格:48T/96T 人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒使用说明书 英文名称:Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISAKit 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断,具体各指标使用说明书请联系客服索取,本模板为通用模板,仅供参考。 试剂盒检测原理: 人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。 用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。 颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 样品收集、处理及保存方法: 1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 自备物品: 1.酶标仪(450nm) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 操作注意事项: 1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。 4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5.所有液体组分使用前充分摇匀。 人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒组成: 试剂的准备: 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。 洗板方法: 1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。 2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。 人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒操作步骤: 1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL; 3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。 4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。 6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。 结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
研发、生产科研产品:
ELISA试剂盒:多种属、1000多种指标:人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、仓鼠、猪、马、鸡、犬、豚鼠、猴、绵羊 抗体:兔多抗、鼠单抗种类丰富,一抗1万余种,二抗100多种; 重组蛋白:多项发明专利,原核表达系统稳定表达蛋白1000余种。 在线联系:(周经理) 17621047120QQ:2441609688(任经理) 官方电话: 400-788-2680 更多elisa试剂盒:http://www.shyx-bio.com/product-32-1-1.html |