小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒 英文名称:Mouse leukotriene B4 (LTB4) ELISA Kit 小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒相关实验原理 利用纯化的抗体包,制成固相载体,向包被的相应抗体内的微孔中依次加入标本或者标准品、实验试剂、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后加入TBM使底物显色。因为TMB会在过氧化物酶的催化下从黄色转化成蓝色,并且在酸的作用下再次转变颜色。 其中颜色的深浅程度和样品中的该指标含量呈正相关。 利用酶标仪在450nm波长下可以测定吸光度(OD值),并且可以计算实验试剂的相关浓度。 规格:48T/96T 产品保存:2-8℃,有效期6个月 产品销售优势:证书护航,高质量保证。 产品特点:实验敏感性高、抗体结合特异性强、数据重复性好、试剂反应稳定、容易保存,实验操作简便。 产品用途:用于测定相关生物液体样本中相关含量表达,仅供科研实验,不做其它用途。 产品组成及试剂配制 : 1. 酶联板:一块 2. 标准品:2瓶,每瓶临用前需要稀释液稀释至1ml,然后反复摇晃直至溶解,可以分别稀释不同浓度的试剂样液,并且请在实验开始前15分钟内配制。 3. 样品稀释液:20ml/瓶。 4. 检测稀释液AB液:各10ml/瓶。 5.检测溶液AB液:实验开始前请按照1:100的比例稀释。实际配制时应多配制0.1-0.2ml,应该在使用前一小时内配制。 6. 终止液:10ml/瓶(2N,硫酸)。 7.底物溶液:10ml/瓶。 8.浓洗涤液:30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒实验步骤
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,另设一个空白对照。 (2)酶标板置4℃,包被过夜实验开始前请取出试剂放置室温下至少15分钟,在开始实验。 (3)洗板:实验开始或者结束后利用洗板机进行清洗 (4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl。 (5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 (6)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 (7)酶标板置37℃培养箱内,孵育60min。 (8)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 (9)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应,并且记录实验数据。
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒的注意事项:
1. 当混合蛋白溶液时操作应该轻柔缓慢,避免试剂起泡。 2.注意充分洗涤,不充分的洗涤易造成实验误差。 3. 如果试剂浓度过高,请于稀释后进行实验 4.请每次测定数据的同时,也要进行曲线制作。 5. 本产品需要避光且低温保存 6. 在检测溶液工作液时,请以相关的稀释液配制,切记不能混淆。
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