小鼠补体蛋白4elisa试剂盒

小鼠补体蛋白4elisa试剂盒研究锤头状核酶通过调控CD95的表达,对小鼠胰岛细胞凋亡的影响;探索提高胰岛移植物存活率的新途径.方法体外构建针对CD95 mRNA 93位点的锤头状核酶(pU6-Rz93)和突变型核酶(pU6-dRz93).采用Ⅴ型胶原酶消化法分离小鼠胰岛细胞,通过干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素1α(IL-1α)诱导其高表达CD95后,经钠米载体-Effectene将核酶转染至该细胞.通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹检测(Western blot)法检测胰岛细胞CD95的表达.胰岛细胞经抗CD95的抗体(JO2)作用后,以Caspase-3活性检测试剂盒检测转染前后细胞Caspase-3活性的变化;MTT法测细胞的增殖;Annexin-Ⅴ凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡,并观察了各组细胞对细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤的反应能力.结果细胞因子可诱导小鼠胰岛细胞高表达CD95分子.转染pU6-Rz93组的胰岛细胞CD95的表达与转染空载体组和转染pU6-dRz93组相比,明显下降.经JO2处理后,转染pU6-Rz93组胰岛细胞的Caspase-3活性和凋亡率明显降低,细胞增殖活性和抵抗CTL杀伤的能力显著增强.结论针对Fas mRNA 93位点的锤头状核酶能显著抑制小鼠胰岛细胞CD95的表达,使其免于CD95途径的凋亡;为提高胰岛移植物的存活率提供了实验基础。

小鼠补体蛋白4elisa试剂盒核因子kB受体活化因子配基(RANKL)是诱导破骨细胞分化， 成熟的重要因子，在生物学及医学研究中具有广泛的应用。RANKL主要结合到破骨前体细胞的核因子kB活化因子受体(RANK)上，启动下游NF- kB，P38，ERK，JNK等信号通路，刺激破骨细胞的分化，成熟及成熟后的破骨细胞存活。由于RANKL在破骨细胞的发育过程中发挥重要作用，所以它 的失调可引发多种骨骼疾病，如骨质疏松，风湿性关节炎等疾病。

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