兔转化生长因子β(TGF-β)elisa试剂盒

兔转化生长因子β(TGF-β)elisa试剂盒目的探讨亚低温预处理肝缺血再灌注损伤(HIRI)大鼠模型的保护作用机理。方法将40只SD大鼠分为4组:假手术(Sham)组、HIRI组、亚低温处理(MH)组和MH+LY294002处理(MH+LY)组,每组10只,分别于肝缺血再灌注3、6、12、24 h后收集大鼠的血清及肝组织标本。采用Western Blot检测大鼠肝组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt,Ser308)蛋白的表达水平。采用TUNEL法和Western Blot检测分析肝组织中细胞凋亡和凋亡相关蛋白的表达水平。采用ELISA试剂盒检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。采用全自动生化分析仪检测大鼠血清ALT、AST活性。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果 HIRI组p-PI3K、p-Akt的相对表达水平明显低于Sham组,差异均有统计学意义(q值分别为5. 217、5. 456,P值均0. 01);经亚低温处理后大鼠肝组织中p-PI3K、p-Akt的相对表达水平明显高于HIRI组,差异均有统计学意义(q值分别为10. 434、14. 116,P值均0. 01)。

脆性X综合征（fragile X syndrome，FXS）是常见的遗传性智力低下疾病之一，99%的患者是由FMR1（智力低下基因1）的5’端非编码区的CGG三核苷酸重复序列异常扩增或其上游的CpG岛过度甲基化引起的FMR1的表达产物FMRP（fragile X mental retardation protein，智力低下蛋白）表达下降或缺失所致。定位于3q28的智力低下相关基因FXR1与FMR1属同一基因家族，编码的蛋白质都具有与蛋白质和RNA结合特性。本课题在本实验室前期工作已证明FXR1P与CMAS相互作用的基础上，进一步研究FXR1P与CMAS相互作用后的生物学效应。 目的：研究FXR1P与CMAS相互作用后的生物学效应，为阐明FXR1的基因功能提供实验依据。 方法：1. PCR扩增FXR1基因，将其连接到pcDNA3.1(-)载体上，构建pcDNA3.1(-)/FXR1重组载体，并进行酶切鉴定和测序分析。2.通过Lipofectamine2000转染pcDNA3.1(-)/FXR1重组载体至大鼠上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞和大鼠血管平滑肌细胞VSMC细胞，并通过western blot实验检测转染效率。

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