兔心肌肌钙蛋白(cTn)elisa试剂盒 兔心肌肌钙蛋白(cTn)elisa试剂盒目的探讨亚低温预处理肝缺血再灌注损伤(HIRI)大鼠模型的保护作用机理。方法将40只SD大鼠分为4组:假手术(Sham)组、HIRI组、亚低温处理(MH)组和MH+LY294002处理(MH+LY)组,每组10只,分别于肝缺血再灌注3、6、12、24 h后收集大鼠的血清及肝组织标本。采用Western Blot检测大鼠肝组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt,Ser308)蛋白的表达水平。采用TUNEL法和Western Blot检测分析肝组织中细胞凋亡和凋亡相关蛋白的表达水平。采用ELISA试剂盒检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。采用全自动生化分析仪检测大鼠血清ALT、AST活性。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果 HIRI组p-PI3K、p-Akt的相对表达水平明显低于Sham组,差异均有统计学意义(q值分别为5. 217、5. 456,P值均0. 01);经亚低温处理后大鼠肝组织中p-PI3K、p-Akt的相对表达水平明显高于HIRI组,差异均有统计学意义(q值分别为10. 434、14. 116,P值均0. 01)。
兔心肌肌钙蛋白(cTn)elisa试剂盒本发明涉及一种人活性颗粒酶K重组蛋白(rhGzmK)的制备方法,该重组蛋白去除了人颗粒酶K(hGzmK)N端的24个氨基酸,并在C端增加了6个组氨酸,以方便用镍离子柱进行纯化。其流程是:抽提人NK92细胞的总RNA,利用RT-PCR技术得到hGzmK基因,将之与原核表达载体pET24a(+)相连,构建重组表达质粒pET24a(+)-hGzmK,经转化大肠杆菌BL21后获得工程菌,该工程菌经IPTG诱导可表达rhGzmK。该重组蛋白以包涵体的形式表达,可利用镍亲和层析柱进行纯化,其纯度可达95%以上。该方法具有操作简单、产量高、重组蛋白易于纯化等特点,且纯化蛋白具有较高的生物学活性。
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