鸡马立克氏病病毒抗体elisa试剂盒

鸡马立克氏病病毒抗体ELISA试剂盒定性本研究采用高致病性禽流感病毒(Highlypathogenicavianinfluenzavirus，HPAIV)A/FPV/Rostock/34(H7N1)(FPV)毒株作为免疫原，免疫8周龄BALB/C雌性小鼠，三次加强免疫后取脾细胞与SP2/0细胞融合，用血凝抑制试验(HI)方法检测筛选，阳性细胞克隆经有限稀释法克隆培养，最后获得两株H7亚型HA特异性单抗6H4和7F6，亚类分别为IgG2a、IgG2b，轻链都为k链，经检测具有良好的特异性。采用纯化的HPAIVA/FPV/Rostock/34(H7N1)(FPV)毒株作为免疫原，灭活后加入弗氏完全佐剂和不完全佐剂制成疫苗多次免疫山羊，获得抗H7亚型禽流感的高免羊血清。 

鸡马立克氏病病毒抗体ELISA试剂盒定性为建立敏感、特异、稳定的传染性法氏囊病病毒（IBDV）VP2结构蛋白抗体ELISA检测方法,本试验以杆状病毒表达系统表达的重组IBDV-VP2结构蛋白为抗原,通过包被VP2单克隆抗体捕捉VP2结构蛋白的形式,建立鸡血清VP2结构蛋白抗体ELISA检测方法（VP2-ELISA）。条件优化结果显示：单克隆抗体最适包被质量浓度为3mg/L,VP2最佳稀释度为1∶20,夹心ELISA效价1∶12.8,被捡血清的稀释度为1∶400。该方法与禽流感、鸡新城疫、鸡马立克氏病、鸡传染性喉气管炎病毒及杆状病毒阳性血清无交叉反应,对琼扩效价为1∶32的IBDV阳性血清的最低检出量为1∶12 800,ROC曲线确定的D450nm临界值为0.236,组内、组间重复性试验变异系数均小于10%。用本试验建立的VP2-ELISA方法与进口IBDV-ELISA抗体试剂盒平行检测100份背景已知的临床鸡血清样品,总符合率VP2-ELISA（97%）高于进口ELISA试剂盒（96%）。

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