大鼠5羟色胺2B(5-HT2B)elisa试剂盒

大鼠5羟色胺2B(5-HT2B)elisa试剂盒目的：大鼠3α-HSD[EC1.1.1.50]具有二氢二醇脱氢酶活性，利用该酶可对血 清中的总胆汁酸含量进行检测。为获得3α-HSD高表达工程菌株，也为开发3α-HSD 的临床应用提供资料，本文对大鼠3α-HSD cDNA进行了克隆、表达及表达产物 的纯化，并初步对纯化获得的重组3α-HSD的酶活性进行初步观察。 方法：1、提取大鼠总RNA，通过RT-PCR获得全长的3α-HSD cDNA，并测序鉴 定；2、将3α-HSD cDNA克隆于pET-30a-c（+）载体，形成原核融合表达质粒 pET-30a-c（+）/3α-HSD cDNA，转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS；3、采用不同浓度IPTG、 不同诱导时间、不同温度优化选择pET-30a-c（+）/3α-HSD cDNA转化菌诱导表达融 合蛋白的条件；4、采用His-Bind Resin亲和层析纯化重组表达的融合蛋白；5、 检测pET-30a-c（+）/3α-HSD融合蛋白的3α-HSD活性。 结果与讨论：1、由提取的总RNA有较好的完整性和较高的纯度，紫外分光光度 法定量测得样品中RNA含量为2.88μg/μl。

大鼠5羟色胺2B(5-HT2B)elisa试剂盒目的:探讨黄芩苷抑制脑缺血- 再灌注损伤的作用机制。方法:线栓法制作大脑中动脉缺血-再灌注大鼠模型。应用RT-PCR、Western-blot以及酶免疫测定方法,观察黄芩苷对 环氧化物酶-2(COX-2)、5-脂加氧酶(5-LOX)及其代谢产物前列腺素E2(PGE2)和半胱氨酸白三烯(cys-LT)的影响。使用聚丙烯酰 胺凝胶电泳检测脑组织清蛋白含量,评价黄芩苷对脑缺血-再灌时血脑屏障的影响。结果:①黄芩苷降低脑缺血-再灌注时组织细胞质内5-LOX的含量 (P0.01),抑制cys-LT的合成(P0.01)。②黄芩苷减轻缺血-再灌注损伤时血脑屏障破坏导致的清蛋白渗出(P0.05)。

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