水土中总磷酸盐试剂盒/测试盒

水土中总磷酸盐含量检测试剂盒说明书 微量法

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC4215

规格：100T/96S

产品简介：

总磷酸盐包含正磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、多聚磷酸盐等各种磷酸盐的形式，反应了水土中的磷

酸盐水平，是一个水质和土壤质量评价的重要指标。

在酸性溶液中，在分解剂和高温条件下，将无机磷酸盐和有机磷酸盐水解成正磷酸盐，正磷酸盐可与

钼酸铵反应成磷钼酸，在还原剂存在时被还原为磷钼蓝，在 660nm 处有特征吸收峰。

试验中所需的仪器和试剂： 

可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96 孔板、可调式移液枪、20 目筛、漩

涡震荡仪、EP 管、蒸馏水、浓硫酸。

产品内容： 

试剂一：浓硫酸 10mL×1 瓶，自备。

试剂二：粉剂×2 瓶，4℃保存。每瓶临用前加入 15mL 蒸馏水溶解备用。

试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂四：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加入 5mL 双蒸水，溶解后 4℃保存一周。

试剂五：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加入 5mL 双蒸水，溶解后 4℃保存一周。

试剂六：液体 5mL×1 瓶，室温保存。

标准品：粉剂×1 支，4℃保存。临用前加入 1.4mL 下述稀释液溶解粉剂，配成 20μmol/mL 的磷标准液

稀释液的配制：按蒸馏水体积(mL)：试剂一体积（mL）：试剂二体积（mL）=10:1:2 的比例混合即可，

现用现配。

定磷试剂的配制：按 H2O：试剂四：试剂五：试剂六=2:1:1:1 的比例配制，配好的工作液应为浅黄色。

若变色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，工作液应现配现用

注意：配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。

操作步骤：

一、样本处理： 

1. 水样：按照水样体积（mL）：试剂一体积（mL）：试剂二体积（mL）为 10:1:2 的比例（建议取 1mL

水样，加入 100μL 试剂一和 200μL 试剂二），用封口膜封口，95℃水浴 30min，冷却后待测。

2. 土样：（1）新鲜土样风干，过 20 目筛；（2）按照土壤质量（g）：蒸馏水体积(mL)：试剂一体积（mL）：

试剂二体积（mL）=1:10:1:2（建议称取约 0.1g 土样，加入 1mL 蒸馏水，再加入 100μL 试剂一和 200μL

试剂二），用封口膜封口，95℃水浴振荡 30min，10000g，25℃离心 10min，取上清液待测。

二、测定步骤： 

1、 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 660nm，蒸馏水调零。

2、 将 10μmol/mL 标准液用稀释液稀释为 1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078125、0.039μmol/mL 的

标准溶液备用。

总磷酸盐含量计算

1、 标准曲线的绘制：

以各个标准溶液的浓度为 x 轴，其对应的△A 标准为 y 轴，绘制标准曲线，得到标准方程 y=kx+b，将△

A 带入方程得到 x（μmol/mL）。

2、 总磷酸盐含量的计算：

土样总磷酸盐含量（μmol /g 土样）=x×V 样÷（V 样×W÷V 样总）=1.3x÷W。

水样总磷酸盐含量（μmol /mL 水样）= x×V 样总÷V 水样=1.3x。

V 样：加入样本体积，0.03mL；V 样总：样本处理加到土样中的液体总体积，1.3mL；W：样本质量，g；

V 水样：水样体积，1mL。

注意事项

1、 定磷试剂应现配现用，正常颜色为浅黄色，如有变色或变蓝则均为失效。

2、 加入试剂三后可能会产生絮状沉淀，其对后续实验无影响，加入定磷试剂后即自行消除。

3、 当△A 大于 1 时，建议将样本用稀释液稀释后再进行测定.

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