人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA Kit试剂盒以其具有高特异性、回收率、线性、变异系数、稳定性等特点深受国外市场认可；原鑫生物专注于免疫学、细胞生物学、肿瘤、神经生物学等领域。
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产品介绍

产品名称：人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA Kit

品牌：原鑫生物

货号：YX-E100594

检测方法：双抗夹心

规格：48T/96T

种属：Human

存储：2-8℃6个月

精密度(%)：批内差： CV<10%   批间差： CV<12%

注意事项：人囊虫病抗体(CYT Ab)ELISA Kit仅供科研使用

实验原理

【操作步骤】
1、取出试剂盒，室温（20-25℃）放置30分钟。
2、分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。10个标准孔，1个空白对照
3、标准品的稀释：准备小试管6只，依次编好号码，先在各小试管中加入标准品稀释液100ul，然后取原浓度标准品100ul 加入一只已编好号的试管中，充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第三只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第四只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第五只试管中，充分混匀；然后在该试管中取100ul，弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
4、加样：依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入50ul的蒸馏水；其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
5、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
6、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒弃去，如此重复5次，拍干。
7、加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。
8、温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9、洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸彻底拍干。
10、显色：各孔加入显色剂A液50ul后，再加入显色剂B液50ul。
11、终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入50ul终止液。
12、读板：在450nm波长读取各孔的OD值。
注：读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹，读板时间控制在终止反应后的30分钟内，以免影响准确性。

试剂盒组成及试剂配制
1、酶联板：一块（96孔；48孔）
2、标准品：2瓶
3、样品稀释液：1×20ml/瓶
4、生物素标记抗体稀释液：1×10ml/瓶
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液：1×10ml/瓶
6、生物素标记抗体：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液：1×10ml/瓶
9、浓洗涤液：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液：1×10ml/瓶

【实验材料与试剂配制】
1、仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2、洗液的配制：按比例配制洗液备用。
【样品收集、处理及保存】
1、细胞培养上清：
适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2、细胞：
用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104-106/ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3、血清：
在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4、血浆：
应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。
5、体液：
包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6、组织标本：
切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000rmp离心20分钟，收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
7、保存：
如果样品不能立即检测，应将其分装，-70℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

研发、生产科研产品：

ELISA试剂盒：多种属、1000多种指标：人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、仓鼠、猪、马、鸡、犬、豚鼠、猴、绵羊
抗体：兔多抗、鼠单抗种类丰富，一抗1万余种，二抗100多种；
重组蛋白：多项发明专利，原核表达系统稳定表达蛋白1000余种。

在线联系：（周经理） 17621047120 QQ：2441609688（任经理）
官方电话： 400-788-2680

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