土壤有效硼;测定方法;注意事项
硼是植物正常生长发育不可缺少的微量元素,能够促进植物生长茂盛和生殖器官的正常发育,有利于开花结实,促进作物早熟,提高产量和品质。土壤缺硼,易使作物根尖分生组织的细胞分化和伸长受到抑制,发生木栓化而坏死,并形成“蕾而不花”、“花而不实”、“有壳无仁”及“不穗症”等,严重影响农作物的产量和品质;但供硼过多会使作物形成硼中毒,因此根据土壤有效硼含量,合理供给硼元素是提高作物产量和品质的关键措施之一。土壤有效硼的检测准确度是制定施硼数量的重要依据,现就土壤有效硼检测方法介绍如下。
1主要仪器
实验所用的仪器主要有分光光度计、石英三角瓶(250mL)、10mL的比色管、2cm光径比色皿、石英回流冷却装置等。
2试剂配制
2.1高锰酸钾溶液的配制称取高锰酸钾31.606g溶于水中,稀释至1L。
2.23mol/L 硫酸溶液的配制量取浓硫酸168mL,缓慢加入到盛有约800mL水的大烧杯中,不断搅拌,冷却后,稀释至1L。
2.3酸性高锰酸钾溶液的配制将2.1、2.2中配制的高锰酸钾溶液与硫酸溶液等体积混合。
2.410%(m/v)抗坏血酸溶液的配制称取抗坏血酸10g溶于水中,稀释至100mL。
2.510%的硫酸镁溶液的配制称取10.0g硫酸镁溶于水中,稀释至100mL。
2.60.90%甲亚胺溶液的配制称取甲亚胺0.90g和抗坏血酸2g溶于微热的60mL水中,稀释至100mL。
2.7pH值5.6～5.8缓冲液的配制称取250g乙酸铵和10.0g EDTA二钠盐溶于水中,冷却后稀释至500mL,再加入80mL 1:4硫酸溶液,摇匀用酸度计检查pH。
2.8混合显色剂的配制3份(体积)甲亚胺溶液和2份pH值5.6～5.8缓冲液混合。
2.9硼标准系列溶液的配制称取预先干燥24h的硼酸(优级纯)0.5719g于400mL烧杯中,加无硼水溶液,移入1L容量瓶中定容,贮于塑料瓶中。吸取50.00mL上述溶液于500mL容量瓶中,定容,即为10μg/mL硼标准系列溶液,贮于塑料瓶中。分别吸取0.0mL、0.50mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL于7个50mL容量瓶中,定容,即为0.0 mg/mL、0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.40mg/mL、0.60mg/mL、0.80mg/mL、1mg/mL硼标准系列溶液,贮于塑料瓶中。
3操作步骤
①称取通过2mm孔径尼龙筛的风干土样10g于250mL石英三角瓶中,加入20mL水,装好回流冷凝器,文火煮沸并保持微沸5min(准确计时),移开热源,继续回流冷凝5min(准确计时),取下三角瓶,冷却。同时做空白试验。②在煮沸过的样品溶液中加入2滴硫酸镁溶液加速澄清,1次性倾入滤纸上,滤液承接于塑料瓶中。③吸取4mL滤液于10ml比色管中,加入0.50mL酸性高锰酸钾溶液,摇匀,放置2～3min;加入0.50mL抗坏血酸溶液,摇匀;待紫红色消退且二氧化锰沉淀完全溶解后,加5mL混合显色剂,摇匀;放置1h后,在分光光度计上于波长415nm处,用2cm光径比色皿比色测定,读取吸光度,以扣除空白后的吸光值查校准曲线得到测定液的含硼量。用同样方法做标准曲线。
4结果计算
有效硼(mg/kg)=(m1×D/m×103)×1000
式中:m1为显色液中硼的的含量(μg),D为分取倍数(20/4),m为试样质量。103 和1000为换算系数。
5注意事项
①硼标准系列溶液、高锰酸钾溶液和硫酸溶液应贮于塑料瓶中。高锰酸钾溶液和抗坏血酸要现用现配。②因甲亚胺试剂本身颜色较深,影响吸光度,加入5mL混合显色剂用胖肚吸管,提高准确率,减少误差。③由于溶液吸光度在分光光度计内不太稳定,每批样品要在1h内完成。④每10个土样做1个平行测定,平行测定结果以算术平均值表示,保留2位小数,允许绝对误差。⑤甲亚胺-H比色法适合较高浓度的测定。不同土壤含量的检测灵敏度不同,甲亚胺药品质量对测量结果影响较大。一般优质产品颜色黄亮,无杂质,若有暗黄色杂质、黑色沉淀物较多为劣质药品,测量结果不理想,所以一定选用优质甲亚胺药品。吸取的滤液放在塑料比色管中。塑料比色管一定要清洗干净,以最大可能减少误差。在闭光、恒温的条件下,放在25℃保温箱中1～2h,再用分光光度计测定。 上海原鑫品牌优势 1、产品优势：产品具有高特异性、回收率高、线性好、变异系数低、稳定性好； 2、质量保证：产品质量稳定，每批次产品必须通过QA、QC检测才可出库； 3、实力强大：ISO9001:2015认证，标准实验室、研发中心，动物房，高新技术企业； 4、技术支持：技术部5*8小时技术问题及时解答； 5、服务周到：发货及时，三个工作日顺丰快递；售后无忧，包退包换。 研发、生产科研产品： ELISA试剂盒：多种属、1000多种指标：人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、仓鼠、猪、马、鸡、犬、豚鼠、猴、绵羊 抗体：兔多抗、鼠单抗种类丰富，一抗1万余种，二抗100多种； 重组蛋白：多项发明专利，原核表达系统稳定表达蛋白1000余种。 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ 在线联系：17621047120（周经理） QQ：2441609688 （任经理） 官方电话：400-788-2680 更多生化生理代测检测服务：http://www.shyx-bio.com/daice-34-1-1.html |
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