苯丙氨酸解氨酶(PAL)代测检测服务 
1.测定原理 苯丙氨酸解氨酶(phenylalanineammonialyase，PAL)催化苯丙氨酸的脱氨反应，使NH3释放出来形成反式肉桂酸。此酶的在植物体内次生物质(如木质素等)代谢中起重要作用。根据其产物，反式肉桂酸在290nm处吸光度的变化可以测定该酶的活性。 2.仪器设备 （1）紫外分光光度计（2）高速冷冻离心机 （3）研钵（4）移液管：0.5mL1支，1mL3支，2mL1支，5mL1支 （5）试管:10mL5支（6）恒温水浴 3.试剂 （1）0.1mol·L-1硼酸缓冲液，pH8.8。 （2）0.02mol·L-1L-苯丙氨酸（用pH8.8硼酸缓冲液配制）。 （3）提取介质：内含0.05mol·L-1硼酸缓冲液、5.0mmol·L-1巯基乙醇、1.0mmol·L-1EDTA-Na2、5%甘油pH8.3；5%PVP（聚乙烯吡咯烷酮）。 （4）6mol·L-1HCl。 4.材料 正常生长或经诱导处理的水稻、小麦叶片（或黄化幼苗）、马铃薯块茎等植物新鲜组织。 5.方法步骤 （1）PAL的提取：取待测植物样品1-2g，-15冷冻固定后于研钵中加少量的提取介质、少量石英砂，冰浴研磨匀浆，最后用提取介质定容到10mL，搅拌均匀，4层纱布过滤，滤液在4下10000r/min离心15min，上清液即为待测酶液，4保存备用。 （2）PAL酶活性测定：取4支10mL试管（3支测定管，1支对照管），分别加入0.02mol·L-1L-苯丙氨酸1.0mL（对照管不加，代之为蒸馏水），硼酸缓冲液(pH8.8)2.0mL,酶液1.0mL（根据酶活性适当稀释或增加体积），总体积4.0mL。摇匀后置30恒温水浴保温60min，加0.2mL6mol·L-1HCl终止反应，若有沉淀需过滤或离心。用对照管调零，在290nm处检测测定管反应液的吸光度A290. （3）以测定管反应液每小时A290增加0.01为一个酶活性单位（U）： 式中，Vt：酶液总体积（mL）；FW：样品鲜重（g）；Vs：测定时取酶液的量（mL）;v：反应液总体积（mL）；t：反应时间（h）
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