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RACE-cDNA末端快速扩增检测试剂盒
RACE-cDNA末端快速扩增检测试剂盒
品牌:原鑫生物
货号:YX-D10200
规格:48T/96T
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race检测试剂盒

race检测试剂盒图1

产品名称:cDNA末端快速扩增技术检测试剂盒

英文名称 :Detection Kit for rapid amplification of CDNA ends

产品保存和存储方式:在我们的产品未开封之前,应该放在﹣4摄氏度下进行恒温保存。如果产品开封以后,应该在保质期前尽快使用,而且要在﹣20摄氏度下进行恒温保存。

产品运输保存:我们公司的产品具有一套完整的运输产业链,可以保证客户当天下单,我们当天发货,全程恒温运输,在很大程度上面可以保证试剂活性。

产品保质期:未开封以前,保质期为六个月。 产品特点:

RACE 试剂盒是一种在较高温度下保存 RNA 样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过高效抑制 RNase 的活性而保存 RNA 的完整性。

安装步骤与维护

1. 能浓缩病毒 100 倍以上,适合各种病毒。

2. 比超速离心法、密度梯度离心分离法和过滤法更温和,回收率更高,并且大部分病 毒能保持活性,适合各种后续实验,包括转染实验和核酸纯化。

3. 比超速离心法和密度梯度离心分离法简单,不需要大型离心机等设备。

4. 适合水样、细胞培养基上清和其他不含细胞的样品。本产品 100mL 可以处理 400mL 含病毒的溶液,可以将病毒浓缩 100 倍以上。


race检测试剂盒图2

使用方法

RACE 试剂盒使用方法 :

一:用本产品保存新鲜组织样品

1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积(1g 组织需 10 mL)。

2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。

3. 以*快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。

4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。

5. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的*长存放时间,如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到*后的温度。

二:RACE 试剂盒保存培养细胞、悬浮细胞、细菌和 RNA 病毒:

1. 标记收集管。

2. 将待样品转移到离心管中,离心收集细胞,弃上清。注:处理含病毒的样品(如

血浆)可直接从步骤第 4 步开始。

3. 用冰浴的缓冲液洗一次。

4. 将细胞悬浮在少量缓冲液中。

5. 加入五到十倍体积的本产品,混均; 对病毒样品,加入两到三倍体积的本产品,混均。

6. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超该温度下的*长存放时间。

如果要存放在-20℃或-80℃,需先在4℃放置过夜后再转移到*后温度条件(将

样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液)。

注:样品存放温度与其*长存


race检测试剂盒图3

技术原理

SMARTTM 3'-RACE原理

利用mRNA的3' 末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点,以连有SMART寡核苷酸序列通用接头引物的Oligo(dT)30MN作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA。然后用一个基因特异引物GSP1(gene specific primer,GSP)作为上游引物,用一个含有部分接头序列的通用引物UPM(universal primer,UPM)作为下游引物,以cDNA第一链为模板,进行PCR循环,把目的基因3' 末端的DNA片段扩增出来。(见下图)

SMARTTM 5'-RACE原理

先利用mRNA的3'末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点,以Oligo(dT)30MN作为锁定引物在反转录酶MMLV作用下,反转录合成标准第一链cDNA。利用该反转录酶具有的末端转移酶活性,在反转录达到第一链的5' 末端时自动加上3-5个(dC)残基,退火后(dC)残基与含有SMART寡核苷酸序列Oligo(dG)通用接头引物配对后,转换为以SMART序列为模板继续延伸而连上通用接头(见下图)。然后用一个含有部分接头序列的通用引物UPM(universal primer,UPM)作为上游引物,用一个基因特异引物2(GSP 2 genespecific primer,GSP)作为下游引物,以SMART第一链cDNA为模板,进行PCR循环,把目的基因5'末端的cDNA片段扩增出来。

最终,从2个有相互重叠序列的3'/ 5'-RACE产物中获得全长cDNA,或者通过分析RACE产物的3'和5'端序列,合成相应引物扩增出全长cDNA。


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