小鼠白介素1β(IL-1β)elisa试剂盒 品牌：原鑫生物 货号：YX-SS-B35721 规格：48T/96T   立即购买

小鼠白介素1β(IL-1β)elisa试剂盒

小鼠白介素1β(IL-1β)elisa试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IL-1β抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠IL-1β会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IL-1β抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠IL-1β抗体与结合在包被抗体上的小鼠IL-1β结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，IL-1β浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中IL-1β的浓度。

1.血清：全血样品于室温放置1小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20分钟，取上清即可检测。

2.血浆：抗凝剂推荐使用EDTA-Na2，样品采集后30分钟内于2-8℃，1000×g离心15分钟，取上清即可检测。

组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与 对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1 g的组织样品对应9 mL的PBS，具体体积可根据实验需要适 当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步 裂解组织细胞，可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎。最后将匀浆液于2-8℃，5000×g离心5-10分钟，取 上清检测。

3. 细胞提取液：贴壁 细胞用冷的PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g离心5分钟后收集细胞；悬浮 细胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS洗涤3次。每106个细胞中加入150-200 μL PBS重悬(推荐在PBS 中加入蛋白酶抑制剂；若含量很低可减少PBS的体积)并通过反复冻融或超声使细胞破碎。 将提取液于2-8℃，1500×g离心10分钟，取上清检测。

4. 细胞培养上清或其他生物体液： 收集液体后于2-8℃，1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。

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