血清素/5-羟色胺(ST/5-HT)elisa试剂盒 品牌：原鑫生物 货号：YX-XQ-Q22154 规格：48T/96T   立即购买

血清素/5-羟色胺(ST/5-HT)elisa试剂盒

血清素/5-羟色胺(ST/5-HT)elisa试剂盒采用竞争ELISA法。用ST/5-HT抗原包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的ST/5-HT与包被的ST/5-HT竞争生物素标记的抗ST/5-HT单抗上的结合位点，游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，ST/5-HT浓度与OD450值之间呈反比，通过绘制标准曲线计算出样品中ST/5-HT的浓度。

血清素/5-羟色胺(ST/5-HT)elisa试剂盒方法： 我们测量了来自 Kras G12D/+ /Trp53 R172H/+ 的胰腺中调节 5-HT 合成、包装和降解的蛋白质水平/Pdx1-Cre (KPC) 小鼠，它们会发生胰腺肿瘤，以及 PDAC 细胞系和包含 81 个人类 PDAC 样本的组织微阵列。我们还通过对包含 311 个 PDAC 样本的组织微阵列的免疫组织化学分析，分析了参与 5-HT 合成和降解的蛋白质的表达水平，以及与患者存活时间相关的表达水平。通过ELISA分析14个匹配的PDAC肿瘤和非肿瘤组织中的5-HT水平。PDAC细胞系与5-HT一起温育并测量细胞存活和细胞凋亡。我们分析了 PDAC 细胞中 5-HT 受体 HTR2B 的表达以及受体激动剂和拮抗剂的影响，以及小发夹 RNA 的 HTR2B 敲低。我们确定了 5-HT 刺激对 BxPC-3 细胞基因表达谱的影响。通过免疫荧光和免疫沉淀分析以及通过测定细胞外酸比、葡萄糖消耗和乳酸产生来评估通过 HTR2B 的 5-HT 信号传导对糖酵解的调节。原代 PDAC，无论是否暴露于 SB204741（HTR2B 的选择性拮抗剂），在小鼠体内作为异种移植肿瘤生长，并将 SB204741 施用于荷瘤 KPC 小鼠；通过成像分析测量肿瘤生长和代谢。

血清素/5-羟色胺(ST/5-HT)elisa试剂盒结果： 在 PDAC 标本的组织微阵列的免疫组织化学分析中，调节 5-HT 合成和降解的 TPH1 水平升高和 MAOA 水平降低，与 PDAC 的阶段和大小以及较短的患者存活时间相关。我们发现与非肿瘤胰腺组织相比，人类 PDAC 组织中的 5-HT 水平增加，与非转化胰腺细胞相比，PDAC 细胞系中的 5-HT 水平增加。PDAC 细胞系与 5-HT 的孵育增加了增殖并阻止了细胞凋亡。HTR2B 的激动剂，而不是其他 5-HT 受体，可促进 PDAC 细胞的增殖并阻止其凋亡。在 PDAC 细胞中敲除 HTR2B，或将细胞与 HTR2B 抑制剂一起孵育，减少了它们作为小鼠异种移植肿瘤的生长。我们观察到 PDAC 细胞中 5-HT 和糖酵解通量之间的相关性；在 5-HT 刺激后，PDAC 细胞中参与糖酵解、磷酸戊糖途径和己糖胺生物合成途径的代谢酶水平显着增加。5-HT 刺激导致 HTR2B-LYN-p85 复合物的形成，该复合物通过增加 MYC 和 HIF1A 的蛋白质水平来增加 PI3K-Akt-mTOR 信号传导和 Warburg 效应。向 KPC 小鼠施用 SB204741 减缓了已建立的胰腺肿瘤的生长和代谢，并延长了小鼠的存活期。

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