​单糖成分分析介绍

单糖成分分析的主流检测方法总结，整合自当前研究与实践指南：

一、色谱分析法（主流技术）

高效液相色谱法（HPLC）‌

原理‌：基于单糖极性差异进行分离，常用氨基柱或糖专用柱（如SugarKS系列）。

衍生化必要性‌：

联用紫外/荧光检测器（如PMP衍生化）适用中性/酸性多糖，检出限低至μg/L；

联用示差折光（RID）、蒸发光散射（ELSD）等检测器无需衍生。

局限‌：果糖等非还原糖难以检测。

高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法（HPAEC-PAD）‌

优势‌：无需衍生化，直接分离单糖（含酸性糖、氨基糖），灵敏度高、前处理简单。

适用‌：复杂样品（如糖蛋白、植物多糖）的精确定量。

气相色谱法（GC）‌

流程‌：单糖需衍生化为挥发性衍生物（如硅烷化）后分析。

适用‌：中性单糖分析，分离度好；

局限‌：不适用糖醛酸及热不稳定单糖，衍生步骤繁琐。

薄层色谱法（TLC）‌

特点‌：操作简便、成本低，常用于初步定性；

局限‌：分离度低，重现性受温湿度影响大。

二、质谱与核磁共振技术

质谱联用技术‌

GC-MS‌：高分辨率定量，需衍生化；

LC-MS/MS‌：适用于衍生化单糖的痕量检测。

核磁共振（NMR）‌

原理‌：基于化学位移识别单糖结构（如¹H NMR、CSSF-TOCSY技术）；

优势‌：无需水解/衍生化，可同时区分22种糖类；

局限‌：设备昂贵，需专业操作。

三、生化检测法

酶比色法（如GOD-POD）‌

适用‌：葡萄糖专项检测（如血糖分析），特异性强、干扰少。

还原糖滴定法（如费林试剂法）‌

原理‌：利用还原糖与铜离子的氧化还原反应；

注意‌：需严格控制温度、滴定速度。

四、关键流程与注意事项

步骤‌ ‌操作要点‌

样品前处理‌ 酸水解（HCl/TFA）释放单糖，需优化条件避免降解；多糖提取可选水提/醇沉法。

衍生化选择‌ PMP衍生化适用多数单糖，但果糖检测需换用其他方法；HPAEC-PAD无需衍生。

方法选择‌ 简单定性→TLC；高精度定量→HPAEC-PAD或HPLC-MS；快速筛查→酶法。

五、应用场景推荐

医药/质检‌：HPLC-PMP（稳定性好）或HPAEC-PAD（高效精准）；

食品分析‌：酶比色法（快速）、GC-MS（挥发性糖）；

科研解析‌：NMR（结构鉴定）、HPAEC-PAD（微量组分）。