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    WB法基于‌抗原-抗体特异性结合原理‌,通过‌SDS-PAGE电泳分离蛋白质‌并转印至膜上,利用‌一抗识别目标蛋白‌、‌酶标记二抗催化显色/发光‌实现检测,可定性或半定量分析组织、细胞裂解液等样本中的特定蛋白表达水平。 核心步骤‌包括:样本裂解与离心(去除杂质)→电泳分离→转膜→封闭(减少非特异性结合)→一抗/二抗孵育→底物显色分析。 应用领域‌涵盖‌疾病机制研究‌(如蛋白异常表达分析)、‌药物靶点验证‌及‌抗体特异性验证‌,具有‌高灵敏度‌(检测低至皮克级蛋白)和‌强特异性‌(>95%),需注意避免膜干燥或抗体交叉污染。

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