超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒说明书

生化试剂盒 - 超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒说明书

Superoxide Dismutase (SOD) Activity Assay Kit

一、超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒产品描述 

超氧化物歧化酶（SOD）是一种广泛存在于生物体内的金属酶，作为重要的氧自由基清除剂，能 催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成 H2O2 和 O2。SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶，也是 H2O2 主要生成酶，在生物抗氧化系统中具有重要作用。 黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统能够产生超氧阴离子（O2 -），O2 -可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜， 产物在 560 nm 处具有特征吸收峰；SOD 可清除 O2 -，从而抑制了甲臜的形成，反应液颜色越深，表 明 SOD 活性愈低，反之活性越高，通过吸光值的变化即可表征 SOD 的活性。

二、超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒产品内容图示

三、超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒产品使用说明 

测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿（光径 10 mm）/96 孔板、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。

①粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量及比例） ①组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1：（5-10）的比例（建议称取 0.1 g 组织，加 入 1 mL 提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃ 8000 g 离心 10 min，取上清置于冰上待测。

②细菌或细胞：离心收集细菌或细胞至离心管内，按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL） 为（500-1000）：1 的比例（建议 500 万个细菌或细胞加入 1 mL 提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功 率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 10 s，重复 30 次），4℃ 8000 g 离心 10 min，取上清置于冰上待测。

③血清（浆）、培养液等液体样本：直接检测或使用提取液适当稀释后再进行检测。

吸光值测定：测定 560 nm 处吸光值，记为 A 测定、A 对照、A 空 1、A 空 2；计算 ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 空白=A 空 1-A 空 2。注：空白管 1 和空白管 2 只需测定 1-2 管，每个样本均需设一 个对照管。

超氧化物歧化酶（SOD）活性计算 （1）抑制百分率的计算

注：抑制百分率应控制在 30-70%范围内，越靠近 50%越准确；若抑制百分率小于 30%或大于 70%， 则需要调整样本量后重新测定：若抑制百分率偏高，则需适当稀释样品；若抑制百分率偏低，则需适 当增加样本量后再进行测定，计算时相应修改

SOD 酶活性计算公式图示：

注释：V 反总：反应体系总体积，0.2 mL；V 样：反应体系中加入粗酶液的体积，0.02 mL；V 样 总：粗酶液总体积，1 mL；Cpr：粗酶液蛋白浓度，mg/mL；W：样品质量，g；500：细胞或细菌总 数，500 万；D：样本稀释倍数。

四、超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒注意事项 

①待测样本和试剂二使用时在冰上放置； 

②样本较多时可按表格中试剂用量配置工作液（包含试剂一、二、三），试剂五必须最后加入； 

③为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准）， 确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定， 过程中问题请您及时与工作人员联系。